RECOMBINANT BOTULINUM NEUROTOXIN OF TYPE A AND PREPARATION METHOD THEREOF

Provided are a recombinant BoNT/A and a preparation method thereof. The recombinant BoNT/A is a BoNT/A mutant, the BoNT/A mutant comprising a first peptide fragment and a second peptide fragment, which are linked through an interchain disulfide bond; wherein the first peptide fragment has a mutation at position 134 and/or position 165 compared to the light chain of a wild-type BoNT/A; and/or the second peptide fragment has at least one of the following mutation positions compared to the heavy chain of the wild-type BoNT/A: positions 791, 967, and 1060. The method includes: subjecting the first peptide fragment to a first renaturation treatment to obtain a first denatured product, subjecting the second peptide fragment to a second denaturation treatment to obtain a second denatured product, and subjecting the first denatured product and the second denatured product to a renaturation and assembly treatment to obtain the BoNT/A mutant. L'invention concerne une BoNT/A recombinante et son procédé de préparation. La BoNT/A recombinante est une BoNT/A mutante, la BoNT/A mutante comprenant un premier fragment peptidique et un second fragment peptidique, qui sont liés par l'intermédiaire d'une liaison disulfure interchaîne ; le premier fragment peptidique ayant une mutation en position 134 et/ou en position 165 par rapport à la chaîne légère d'une BoNT/A de type sauvage ; et/ou le second fragment peptidique ayant au moins l'une des positions de mutation suivantes par rapport à la chaîne lourde de la BoNT/A de type sauvage : positions 791, 967 et 1060. Le procédé comprend les étapes consistant à : soumettre le premier fragment peptidique à un premier traitement de renaturation pour obtenir un premier produit dénaturé, soumettre le second fragment peptidique à un second traitement de dénaturation pour obtenir un second produit dénaturé, et soumettre le premier produit dénaturé et le second produit dénaturé à un traitement de renaturation et d'assemblage pour obtenir la BoNT/A mutante.