VERSATILE VECTOR SYSTEM FOR DIRECTED GENE EXPRESSION MODIFICATIONS

The present inventors have shown that, by gene correction-induced regeneration and transposon-mediated chromosomal gene transfer, a versatile technology platform for performing gene function analysis in vivo in the mouse liver has been created. The present technology allows the tag-free expression of proteins of interest and silencing of any arbitrary gene in animal liver, e.g. in the mouse genome. The invention preferably uses the HADHA/B endogenous bidirectional promoter capable of driving well-balanced bidirectional expression and gene silencing using the EF1 based intron harboring silencer elements. The particular usefulness of the technology has been shown in cancer research by creating a p53-silenced and hRasG12V-overexpressing tumor model. Les présents inventeurs ont montré que, par une régénération induite par une correction génique et un transfert de gène chromosomique à médiation par transposon, une plateforme de technologie polyvalente pour effectuer une analyse de fonction génique in vivo dans le foie de souris a été créée. La présente technologie permet l'expression sans marqueur de protéines d'intérêt et l'inhibition de n'importe quel gène arbitraire dans le foie animal, par exemple dans le génome de la souris. L'invention utilise de préférence le promoteur bidirectionnel endogène HADHA/B, capable d'entraîner une expression bidirectionnelle bien équilibrée et une désactivation génique à l'aide des éléments de désactivation de l'intron basés sur l'EF1. L'utilité particulière de cette technologie a été démontrée dans la recherche sur le cancer par la création d'un modèle de tumeur à p53 désactivé et à hRasG12V surexprimé.