EXPONENTIAL BASE-GREATER-THAN-BASE 2 NUCLEIC ACID AMPLIFICATION USING HIGH- AND LOW-TM PRIMERS

Described herein are methods and compositions that provide highly efficient nucleic acid amplification. The method employs pairs of primers that differ significantly in Tm and a novel temperature/time course characterized by a temperature pulse during denaturation that enables a high-Tm primer (but not a low-Tm primer) to anneal and prime the synthesis of an additional nucleic acid strand beyond the two strands synthesized in a cycle of classical PCR. In some embodiments, this allows a 3-fold or greater increase of amplification product for each amplification cycle and therefore increased sensitivity and speed over conventional PCR. La présente invention concerne des procédés et des compositions permettant une amplification hautement efficiente d'acides nucléiques. Le procédé fait appel à des paires d'amorces qui diffèrent grandement en Tm et une nouvelle courbe température/temps caractérisée par une impulsion de température pendant la dénaturation qui permet à une amorce à haut Tm (mais pas à une amorce à bas Tm) de renaturer et d'amorcer la synthèse d'un brin d'acide nucléique supplémentaire au-delà des deux brins synthétisés dans un cycle de PCR classique. Dans certains modes de réalisation, ceci permet d'obtenir une augmentation au moins 3 fois supérieure du produit d'amplification à chaque cycle d'amplification et par conséquent une sensibilité et une vitesse accrues par rapport à la PCR classique.