ENGINEERING OF RHIZOPUS ORYZAE LIPASE TO INCREASE ITS THERMOSTABILITY FOR THE PRODUCTION OF STRUCTURED TRIACYLGLYCEROLS

Described herein are modified enzymes with increased thermostability. The modified enzymes of SEQ ID NO: 3 includes at least one amino acid substitution of SEQ ID NO: 3, the at least one amino acid substitution selected from the group consisting of A8E, S114N, N134Y, T136D, F173Y, Y187N, G193K, Q197H, Q197Y, G228D, S267L, A7R, L113Y, Q150F, Q150H, G155A, S171F, V175F, G177C, T199V, F216Y, S223Y, F261Y, and any combinations thereof. The modified enzymes may be used in methods of forming a first triglyceride by mixing a second triglyceride, a first fatty acid, and the modified enzyme to form the first triglyceride which is a mixture of fatty acids from the second triglyceride and the first fatty acid. Biodiesel may be produced by mixing a fatty acid or a triglyceride, a short-chained alcohol, and the modified enzyme to form a fatty acid ester of the short-chained alcohol. La présente invention concerne des enzymes modifiées présentant une thermostabilité accrue. Les enzymes modifiées de NO ID SEQ : 3 comprennent au moins une substitution d'acide aminé de NO ID SEQ : 3, ladite au moins une substitution d'acide aminé étant choisie dans le groupe constitué par A8E, S114N, N134Y, T136D, F173Y, Y187N, G193K, Q197H, Q197Y, G228D, S267L, A7R, L113Y, Q150F, Q150H, G155A, S171F, V175F, G177C, T199V, F216Y, S223Y, F261Y et toute combinaison de ceux-ci. Les enzymes modifiées peuvent être utilisées dans des procédés de formation d'un premier triglycéride par mélange d'un second triglycéride, d'un premier acide gras et de l'enzyme modifiée pour former le premier triglycéride qui est un mélange d'acides gras provenant du second triglycéride et du premier acide gras. Du biodiesel peut être produit par mélange d'un acide gras ou d'un triglycéride, d'un alcool à chaîne courte et de l'enzyme modifiée pour former un ester d'acide gras de l'alcool à chaîne courte.