SPECIMEN PRETREATMENT METHOD AND USE THEREOF

Conventional protein-containing specimen pretreatment methods preceding analysis using LC-MS or electrophoresis are time-consuming, which is a limitation for various applications of the methods. Said methods also have problems such as sample loss. Development of a rapid and highly efficient pretreatment method with which said problems can be solved was necessary. Provided is a pretreatment method for a specimen containing a protein, said method including: a step for simultaneously carrying out protein denaturation and protein digestion which uses a heat-resistant enzyme immobilized on a substrate; and a step for recovering digested peptides. Les procédés conventionnels de prétraitement des échantillons contenant des protéines avant l'analyse par LC-MS ou électrophorèse sont longs à mettre en œuvre, ce qui constitue une limitation pour les diverses applications de ces procédés. Lesdits procédés présentent également des problèmes tels que la perte d'échantillon. Il était donc nécessaire de mettre au point un procédé de prétraitement rapide et très efficace permettant de résoudre ces problèmes. La présente invention concerne un procédé de prétraitement d'un échantillon contenant une protéine, ledit procédé comprenant : une étape pour effectuer simultanément la dénaturation et la digestion de la protéine utilisant une enzyme thermorésistante immobilisée sur un substrat ; et une étape pour collecter les peptides digérés. LC-MS又は電気泳動による分析に先立つタンパク質含有検体の従来の前処理方法は長時間を要し、様々な適用への制限となっており、またサンプル損失等の問題もあった。これらの課題を解決することができる迅速かつ高効率の前処理方法の開発が必要とされていた。 タンパク質の変性と、基質に固定化された耐熱性酵素を用いるタンパク質の消化とを同時に行う工程と、消化されたペプチドを回収する工程とを含む、タンパク質を含む検体の前処理方法を提供する。