IMPROVED ANTIBODY MANUFACTURE

Described herein is a method for assessing disulfide bond reduction potential of a protein of interest comprising the following steps: providing a cell culture fluid sample comprising mammalian cells expressing a protein of interest at a concentration within the range of between 0.2 g/L to 10 g/L, f...

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Hauptverfasser: LIU, Yi, THAI, Vu, TJANDRA, Hendri
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:Described herein is a method for assessing disulfide bond reduction potential of a protein of interest comprising the following steps: providing a cell culture fluid sample comprising mammalian cells expressing a protein of interest at a concentration within the range of between 0.2 g/L to 10 g/L, filtering said cell culture fluid sample over at least one filter, displacing O2 in the filtered cell culture fluid sample, collecting at least one sample of the O2-displaced filtered cell culture fluid sample, separating the proteins in said at least one O2-displaced, filtered cell culture fluid sample according to their size under non-denaturing conditions, and determining the disulfide bond reduction potential of the protein of interest. L'invention concerne un procédé d'évaluation du potentiel de réduction de la liaison disulfure d'une protéine d'intérêt, comprenant les étapes suivantes : la fourniture d'un échantillon de fluide de culture cellulaire comprenant des cellules de mammifères exprimant une protéine d'intérêt à une concentration comprise entre 0,2 g/l à 10 g/l, la filtration dudit échantillon de fluide de culture cellulaire sur au moins un filtre, le déplacement d'O2 dans l'échantillon de fluide de culture cellulaire filtré, la collecte d'au moins un échantillon de l'échantillon de fluide de culture cellulaire filtré avec O2 déplacé, la séparation des protéines dans ledit au moins un échantillon de fluide de culture cellulaire filtré avec O2 déplacé en fonction de leur taille dans des conditions non dénaturantes, et la détermination du potentiel de réduction de la liaison disulfure de la protéine d'intérêt.