UNIVERSAL FLUORESCENT NANOPROBES FOR ONE-STEP ISOTHERMAL NUCLEIC ACID AMPLIFICATION ASSAY

The present invention provides a universal fluorescent probing system and method for result readout of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) or reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP) in a closed-tube manner using at least three different types of universal quantum dot probes, including sulfonate-, carboxyl-, and amine-modified quantum dots (QDs). Detection mechanism of the present system and method relies on a co-precipitation of the modified QDs with magnesium pyrophosphate crystals (one of the positive LAMP/RT-LAMP reaction products) formed during the reaction. The present system and method are advantageous over the existing technologies in terms of simple preparation, low cost, as well as excellent universality, specificity and sensitivity. La présente invention concerne un système de sondage fluorescent universel et un procédé de lecture des résultats de l'amplification isotherme à médiation par boucles (LAMP) ou de l'amplification isotherme à médiation par boucles de transcription inverse (RT-LAMP) en tube fermé, utilisant au moins trois types différents de sondes universelles à points quantiques, notamment des points quantiques (QD) modifiés par des sulfonates, des carboxyles et des amines. Le mécanisme de détection du présent système et procédé repose sur une coprécipitation des QD modifiés avec des cristaux de pyrophosphate de magnésium (l'un des produits positifs de la réaction LAMP/RT-LAMP) formés au cours de la réaction. Le présent système et le présent procédé sont avantageux par comparaison avec les technologies existantes quant à la simplicité de préparation, au faible coût, ainsi qu'à leur excellente universalité, spécificité et sensibilité.