INTEGRATED MOLECULAR AND GLYCO-ENGINEERING OF COMPLEX VIRAL GLYCOPROTEINS

This invention relates to a method for increasing the expression, increasing glycosylation efficiency, reducing plant specific modifications, reducing aggregation and/or promoting the correct folding and oligomerisation of a heterologous polypeptide of interest in a plant cell, preferably a complex glycoprotein, wherein the method comprises co-expressing the heterologous polypeptide of interest with (i) a polypeptide encoding a mammalian chaperone protein, (ii) a polypeptide which improves N-glycan occupancy in the heterologous polypeptide of interest, and (iii) a nucleic acid which interferes with an enzyme which is responsible for the formation of truncated glycans in the plant cell and thus reduces the formation of truncated glycans. The invention further relates to plant cells and plants which, either transiently or stably, co-express the heterologous polypeptide of interest, the mammalian chaperone protein, the polypeptide which improves glycan occupancy and nucleic acid. La présente invention concerne un procédé permettant d'augmenter l'expression, d'accroître l'efficacité de la glycosylation, de réduire les modifications spécifiques aux plantes, de réduire l'agrégation et/ou de favoriser le repliement et l'oligomérisation corrects d'un polypeptide hétérologue d'intérêt dans une cellule végétale, de préférence une glycoprotéine complexe, le procédé comprenant la co-expression du polypeptide hétérologue d'intérêt avec (i) un polypeptide codant pour une protéine chaperonne de mammifère, (ii) un polypeptide améliorant l'occupation du N-glycane dans le polypeptide hétérologue d'intérêt, et (iii) un acide nucléique interférant avec une enzyme responsable de la formation de glycanes tronqués dans la cellule végétale et réduisant ainsi la formation de glycanes tronqués. L'invention concerne également des cellules végétales et des plantes co-exprimant, de manière transitoire ou stable, le polypeptide hétérologue d'intérêt, la protéine chaperon de mammifère, le polypeptide améliorant l'occupation des glycanes et l'acide nucléique.