CELL CULTURE METHOD AND CELL CULTURE DEVICE USED THEREFOR

The present invention provides: a cell culture method that enables mass production of a BBB model which has a three-layer structure comprising vascular endothelial cells, pericytes, and astrocytes; a cell culture device that is used for the cell culture method; and a cell culture method that enables an increase in mass productivity of the BBB model. A cell culture method according to the present invention comprises: a step for dispensing a culture solution that is in a suspension state onto the outer surface of a porous film of a cell culture insert; a step for seeding astrocyte cells in the culture solution and culturing astrocytes; a step for seeding pericyte cells inside the cell culture insert that has been turned upside down, and culturing pericytes; a step for seeding thermosensitive vascular endothelial cells that are embedded in thermosensitive gel, and culturing vascular endothelial cells; and a step for dissolving the thermosensitive gel. La présente invention concerne : un procédé de culture cellulaire qui permet la production de masse d'un modèle de BBB qui a une structure à trois couches comprenant des cellules endothéliales vasculaires, des péricytes et des astrocytes ; un dispositif de culture cellulaire qui est utilisé pour le procédé de culture cellulaire ; et un procédé de culture cellulaire qui permet une augmentation de la productivité de masse du modèle BBB. Un procédé de culture cellulaire selon la présente invention comprend : une étape consistant à distribuer une solution de culture qui est dans un état de suspension sur la surface externe d'un film poreux d'un insert de culture cellulaire ; une étape consistant à ensemencer des cellules d'astrocytes dans la solution de culture et à cultiver les astrocytes ; une étape consistant à ensemencer des cellules péricytes à l'intérieur de l'insert de culture cellulaire qui a été retourné, et à cultiver les péricytes ; une étape consistant à ensemencer des cellules endothéliales vasculaires thermosensibles qui sont incorporées dans un gel thermosensible, et à cultiver des cellules endothéliales vasculaires ; et une étape consistant à dissoudre le gel thermosensible. 血管内皮細胞、ペリサイト及びアストロサイトからなる３層構造のＢＢＢモデルを量産することが可能な細胞培養方法及びそれに用いられる細胞培養装置並びにその量産性を高めることが可能な細胞培養方法を提供する。 本発明の細胞培養方法は、細胞培養インサートの多孔質膜の外面に懸濁状態の細胞培養液を注入する工程と、この細胞培養液にアストロサイトの細胞を播種してアストロサイトを培養する工程と、上下を反転させた細胞培養インサートの内部にペリサイトの細胞を播種してペリサイトを培養する工程と、温度感受性を有する血管内皮細胞を温度感受性ゲルに包埋された状態で播種して血管内皮細胞を培養する工程と、温度感受性ゲルを溶解させる工程を備えている。