METHODS FOR THE PREPARATION OF BIOCONJUGATES

The present invention concerns the use of a surfactant in a bioconjugation reaction wherein a biomolecule comprising one or more azide moieties is connected to an cyclic alkyne comprising payload. More specifically, the invention concerns a method for the preparation of a bioconjugate of structure B-(Z-L-D)x (1), comprising reacting (i) an alkyne or alkene compound of structure Q-L-D (2), wherein Q is a click probe comprising a cyclic alkyne moiety or a cyclic alkene moiety, L is a linker, and D is a payload; with (ii) a molecule of structure B-(F)x (3), wherein B is a biomolecule that is functionalized with x click probes F; F is a click probe capable of reacting with Q, and x is an integer in the range of 1 - 10, in presence of a surfactant. The use of the surfactant increases the conversion of the bioconjugation reaction; increases the yield of the bioconjugation reaction; reduces the amount of organic co-solvent in the solvent system wherein the bioconjugation reaction is performed; provides flexibility in the concentration of biomolecule during the bioconjugation reaction; reduces the excess of alkyne- or alkene-functionalized payload used during the bioconjugation reaction; reduces the extent of aggregate formation during the bioconjugation reaction and simplifies downstream processing of the bioconjugate. La présente invention concerne l'utilisation d'un tensioactif dans une réaction de bioconjugaison, une biomolécule comprenant une ou plusieurs fractions azotures étant reliée à un alcyne cyclique comprenant une charge utile. Plus spécifiquement, l'invention concerne un procédé de préparation d'un bioconjugué de structure B-(Z-L-D)x (1), comprenant la réaction (i) d'un composé alcyne ou alcène de structure Q-L-D (2), Q étant une sonde de chimie clic comprenant une fraction alcyne cyclique ou une fraction alcène cyclique, L étant un lieur, et D étant une charge utile ; avec (ii) une molécule de structure B-(F)x (3), B étant une biomolécule qui est fonctionnalisée avec x sondes de chimie clic F ; F étant une sonde de chimie clic capable de réagir avec Q, et x étant un nombre entier dans une plage de 1 à 10, en présence d'un tensioactif. L'utilisation du tensioactif accroît la conversion de la réaction de bioconjugaison ; accroît le rendement de la réaction de bioconjugaison ; réduit la quantité de co-solvant organique dans le système solvant dans lequel la réaction de bioconjugaison est effectuée ; fournit une souplesse dans la concentration de la bio