CELL CULTURE MEDIUM FOR USE IN PRODUCING GENE THERAPY PRODUCTS IN BIOREACTORS

The present disclosure describes methods and systems for use in the production of adeno- associated virus (AAV) particles, compositions, and formulations, including recombinant adeno-associated viruses (rAAV). The present disclosure presents cell culture mediums for use in producing adeno-associated...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: MATHUR, Krishanu, YI, Dongyang, GUILLEMIN, Zeynep, SLADE, Peter, LY, Charles, NEUMAN, Anastasia
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:The present disclosure describes methods and systems for use in the production of adeno- associated virus (AAV) particles, compositions, and formulations, including recombinant adeno-associated viruses (rAAV). The present disclosure presents cell culture mediums for use in producing adeno-associated viruses (AAV), such as AAV which comprise a polynucleotide encoding a payload. In certain embodiments, the cell culture medium comprises a hydrolysate mixture, L-glutamine, poloxamer 188 (e.g., 10% pluronic F-68), a lipid emulsion, and a cholesterol mixture. In certain embodiments, the production process and system use Spodoptera fmgiperda insect cells (such as Sf9 or Sf21) as viral production cells (VPCs). In certain embodiments, the production process and system use Baculo viral Expression Vectors (BEVs) and/or Baculoviral Infected Insect Cells (BIICs) in the production of rAAVs. La présente divulgation concerne des procédés et des systèmes destinés à être utilisés dans la production de particules, de compositions et de formulations de virus adéno-associés (AAV), notamment de virus adéno-associés recombinés (rAAV). La présente divulgation concerne des milieux de culture cellulaire destinés à être utilisés dans la production de virus adéno-associés (AAV), tels que des AAV qui comprennent un polynucléotide codant pour une charge utile. Dans certains modes de réalisation, le milieu de culture cellulaire comprend un mélange d'hydrolysat, de la L-glutamine, de poloxamère 188 (par exemple du Pluronic F-68 à 10 %), une émulsion lipidique et un mélange de cholestérol. Dans certains modes de réalisation, le procédé et le système de production utilisent des cellules d'insectes Spodoptera frugiperda (telles que Sf9 ou Sf21) en tant que cellules de production virale (VPC). Dans certains modes de réalisation, le procédé et le système de production utilisent des vecteurs d'expression d'un baculovirus (BEV) et/ou des cellules d'insecte infectées par un baculovirus (BIIC) dans la production de rAAV.