PRODUCTION OF SOLUBLE RECOMBINANT PROTEIN

The invention is directed to methods and compositions for the expression and purification of products such as peptides and proteins in microorganisms. In particular, pre-products are expressed recombinantly, wherein the cytoplasm of the microorganism alters the expressed pre-products to produce products in an active/final or otherwise desirable form. Alterations associated with expression of a desired recombinant product include shifting of the redox state of the cytoplasm to allow proper protein folding, site-directed cleavage of pre-proteins to activate the protein, site-directed cleavage of an unwanted methionine from the N terminus of the protein, and/or one or more ligations to form desired protein configurations, all within the same cell. L'invention concerne des procédés et des compositions pour l'expression et la purification de produits tels que des peptides et des protéines dans des micro-organismes. En particulier, des pré-produits sont exprimés par recombinaison, le cytoplasme du micro-organisme modifiant les pré-produits exprimés pour produire des produits sous une forme active/finale ou autrement souhaitable. Des modifications associées à l'expression d'un produit recombinant souhaité comprennent le décalage de l'état redox du cytoplasme pour permettre un repliement correct des protéines, le clivage site-dirigé de pré-protéines pour activer la protéine, le clivage site-dirigé d'une méthionine indésirable à partir de l'extrémité N de la protéine, et/ou une ou plusieurs ligations pour former des configurations souhaitées des protéines, le tout dans la même cellule.