COMPOSITIONS AND METHODS FOR GENERATING MASSIVELY PARALLEL NUCLEIC ACID SEQUENCING LIBRARIES

Oligonucleotide primers and methods of use in producing sequencing libraries are provided according to aspects of the present disclosure which include, from 5' to 3', a homopolymer-hybridizing region, and an anchor region comprising 5'- (λ)nNm-3', wherein the homopolymer-hybridizing region is a contiguous sequence of 5 to 20 elements, wherein the elements are nucleotides or Tm increasing nucleotide analogs, wherein at least 4 of the elements are Tm increasing nucleotide analogs, wherein the homopolymer- hybridizing region hybridizes to a complementary homopolymer tract of a target nucleic acid, wherein the complementary homopolymer tract comprises a contiguous sequence of complementary elements, wherein λ is any nucleotide or nucleotide analog with the proviso that λ is not a nucleotide or nucleotide analog complementary to a complementary element of the complementary homopolymer tract, and wherein N is any nucleotide or nucleotide analog. La présente inventions concerne des amorces oligonucléotidiques et des procédés d'utilisation dans la production de banques de séquençage selon des aspects de la présente divulgation comprenant, de 5' à 3', une région d'hybridation homopolymère, et une région d'ancrage comprenant 5'- (λ)nNm-3', la région d'hybridation homopolymère étant une séquence contiguë de 5 à 20 éléments, les éléments étant des nucléotides ou des analogues nucléotidiques augmentant Tm, au moins 4 des éléments étant des analogues nucléotidiques augmentant Tm, la région d'hybridation homopolymère s'hybridant à un tractus homopolymère complémentaire d'un acide nucléique cible, le tractus homopolymère complémentaire comprenant une séquence contiguë d'éléments complémentaires, λ étant un quelconque nucléotide ou analogue nucléotidique à la condition que λ n'est pas un nucléotide ou un analogue nucléotidique complémentaire d'un élément complémentaire du tractus homopolymère complémentaire, et N étant un quelconque nucléotide ou analogue nucléotidique.