METHOD FOR PRODUCING FUSION PROTEIN OF SERUM ALBUMIN AND GROWTH HORMONE

Disclosed is a method for producing a fusion protein of human serum albumin and human growth hormone. The method includes: (a) a step for culturing, in a serum-free medium, mammalian cells which produce the fusion protein, and dispersing the fusion protein in a culture solution; (b) a step for remov...

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Hauptverfasser: OKADA Yuko, KOTANI Ayaka, HATANO, Yukichi, KATSUNO Ryota, FUKUI, Tsuyoshi, KAKIMOTO Shinji
Format: Patent
Sprache:eng ; fre ; jpn
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Beschreibung
Zusammenfassung:Disclosed is a method for producing a fusion protein of human serum albumin and human growth hormone. The method includes: (a) a step for culturing, in a serum-free medium, mammalian cells which produce the fusion protein, and dispersing the fusion protein in a culture solution; (b) a step for removing the mammalian cells from the culture solution to recover a culture supernatant; and (c) a step for purifying the fusion protein from the culture supernatant by using a column chromatography in which a material to which an antibody having affinity for the fusion protein binds is used as a stationary phase, a chromatography in which a material having affinity for a phosphate group is used as a stationary phase, a cation exchange column chromatography, or a size exclusion column chromatography. L'invention concerne un procédé de production d'une protéine de fusion de sérum-albumine humaine et d'hormone de croissance humaine. Le procédé comprend : (a) une étape de culture, dans un milieu exempt de sérum, de cellules de mammifère qui produisent la protéine de fusion, et la dispersion de la protéine de fusion dans une solution de culture ; (b) une étape pour retirer les cellules de mammifère de la solution de culture pour récupérer un surnageant de culture ; et (c) une étape de purification de la protéine de fusion à partir du surnageant de culture au moyen d'une chromatographie sur colonne dans laquelle un matériau auquel un anticorps ayant une affinité pour la protéine de fusion se lie est utilisée comme phase stationnaire, une chromatographie dans laquelle un matériau ayant une affinité pour un groupe phosphate est utilisée comme phase stationnaire, une chromatographie sur colonne échangeuse de cations, ou une chromatographie sur colonne d'exclusion stérique. ヒト血清アルブミンとヒト成長ホルモンとの融合蛋白質の製造方法が開示されている。当該方法は,(a)該融合蛋白質を産生する哺乳動物細胞を無血清培地中で培養して該融合蛋白質を培養液中に分泌させるステップと,(b)培養液から哺乳動物細胞を除去することにより培養上清を回収するステップと,(c)培養上清から,該融合蛋白質に親和性を有する抗体を結合させた材料を固定相として用いたカラムクロマトグラフィーと,リン酸基に対する親和性を有する材料を固定相として用いたカラムクロマトグラフィーと,陽イオン交換カラムクロマトグラフィー,及びサイズ排除カラムクロマトグラフィーとを用いて,該融合蛋白質を精製するステップと,を含んでなるものである。