METHODS AND COMPOSITIONS FOR ENHANCING AAV-MEDIATED HOMOLOGOUS RECOMBINATION USING RIBONUCLEOTIDE REDUCTASE INHIBITORS

The present disclosure provides methods and compositions for facilitating efficient adeno-associated virus (AAV)-based homologous recombination (HR). Subject methods include a step of contacting a cell (e.g., a population of cells) with a ribonucleotide reductase inhibitor, which provides for increased HR efficiency compared to performing HR in the absence of the inhibitor. The cell is also contacted with a recombinant adeno-associated virus (rAAV) that includes a donor DNA having a sequence cassette (i.e., a nucleotide sequence of interest) flanked by homology arms that facilitate integration of the sequence cassette into a target genomic locus via HR. La présente invention concerne des procédés et des compositions pour faciliter une recombinaison homologue (RH) à base de virus adéno-associé (AAV) efficace. Les procédés selon l'invention comprennent une étape de mise en contact d'une cellule (par exemple, une population de cellules) avec un inhibiteur de la ribonucléotide réductase, qui permet d'obtenir une efficacité de RH accrue par rapport à la réalisation d'une RH en l'absence de l'inhibiteur. La cellule est également mise en contact avec un virus adéno-associé recombiné (rAAV) comprenant un ADN donneur ayant une cassette de séquence (c'est-à-dire une séquence nucléotidique d'intérêt) flanquée de bras d'homologie facilitant l'intégration de la cassette de séquence dans un locus génomique cible par l'intermédiaire d'une RH.