SITE-SPECIFIC, KINETICALLY INERT CONJUGATION OF LABELS AND/OR CARRIERS TO TARGET MOLECULES SUCH AS HIS-TAGGED PROTEINS VIA METAL COMPLEX REAGENTS

The present invention relates to means and methods for conjugating/ attaching target molecules such as proteins to a label and/or carrier. Specifically, the present invention provides a complex comprising a metal cation coordinating (i) nitrate as a metal cation ligand and (ii) a metal cation chelating domain comprising a chelating ligand and a label and/or carrier. This complex can be used for attaching a label and/or a carrier to a target molecule, preferably a protein. The attachment of the label or carrier via the complex of the invention involves the replacement of the metal cation ligand with a coordinating group of the target molecule so that a product complex with the target molecule as primary ligand in the coordination sphere of the metal cation is formed. Accordingly, the present invention also provides for uses and methods involving the attachment of a label and/or carrier to a target molecule. Also provided are the products obtained by the labeling and or carrier-attaching methods of the invention and uses thereof. The invention further relates to methods for producing the complex of the invention and kits comprising the components for producing the complex of the invention. La présente invention concerne des moyens et des méthodes pour conjuguer / lier des molécules cibles telles que des protéines à un marqueur et/ou à un support. Plus précisément, la présente invention concerne un complexe comprenant un cation métallique, coordonnant (i) un nitrate en tant que ligand de cation métallique et (ii) un domaine de chélation de cation métallique comprenant un ligand chélatant et un marqueur et/ou un support. Ledit complexe peut être utilisé pour fixer un marqueur et/ou un support à une molécule cible, de préférence une protéine. La fixation du marqueur ou du support par l'intermédiaire du complexe de l'invention consiste à remplacer le ligand de cation métallique par un groupe de coordination de la molécule cible, de façon à ce que soit formé un complexe de produit avec la molécule cible en tant que ligand primaire dans la sphère de coordination du cation métallique. Ainsi, la présente invention concerne également des utilisations et des méthodes impliquant la fixation d'un marqueur et/ou d'un support à une molécule cible. L'invention concerne également les produits obtenus par les méthodes de marquage et de fixation de support de l'invention, et des utilisations de ces derniers. L'invention concerne également des méthodes pour produire le complex