OPTIMAL CHROMOSOMAL INSERTION LOCI

The present invention is in the technical field of synthetic biology and metabolic engineering. More particularly, the present invention relates to a method to determine the expression stability of a heterologous gene at a chromosomal location in a cell undergoing burden and to produce mutated cells or organisms transformed with a heterologous gene at a chromosomal location, wherein the expression of said heterologous gene is not influenced by a burden or wherein the expression of said heterologous gene is reduced by a burden. The present invention describes methods to locate interesting chromosomal knock-in locations in a cell. Such engineered cells and organisms are applied for the production of bioproducts, such as but not limited to carbohydrates, lipids, proteins, organic acids, amino acids, alcohols, antibiotics and peptides. Preferably, the invention is applied in the technical field of fermentation of metabolically engineered microorganisms. La présente invention concerne le domaine technique de l'ingénierie biologique et métabolique de synthèse. Plus particulièrement, la présente invention concerne un procédé pour déterminer la stabilité d'expression d'un gène hétérologue à un emplacement chromosomique dans une cellule subissant une charge et pour produire des cellules ou des organismes mutés transformés avec un gène hétérologue à un emplacement chromosomique, l'expression dudit gène hétérologue n'étant pas influencée par une charge ou l'expression dudit gène hétérologue étant réduite par une charge. La présente invention concerne des procédés pour localiser des emplacements de knock-in chromosomique intéressants dans une cellule. De telles cellules et organismes modifiés sont appliqués pour la production de bioproduits, tels que, mais sans y être limités, des glucides, des lipides, des protéines, des acides organiques, des acides aminés, des alcools, des antibiotiques et des peptides. Plus particulièrement, la présente invention concerne le domaine technique de la fermentation de micro-organismes métaboliquement modifiés.