GENETICALLY ENGINEERED CYANOBACTERIA FOR GROWTH IN UNSTERILIZED CONDITIONS USING ANTIBIOTIC-FREE SELECTION

The present invention relates to methods of metabolic engineering cells to increase their ability to compete with contaminating microorganisms without the need for antibiotics. More particularly, the invention provides methods to engineer cyanobacteria to utilize melamine as nitrogen source, phosphite as phosphorous source, optionally also utilizing NADP+ over NAD+, and also provides genetically engineered cyanobacteria made using such methods. In a particular embodiment, the genetically engineered cells are cyanobacterium transformed by at least one polynucleotide molecule comprising heterologous melamine utilization pathway genes, atzD, trzE, DUR1,2, trzC, guaD and triA operably linked to at least one promoter and/or comprising a further phosphite dehydrogenase (ptxD ) gene. La présente invention concerne des procédés de génie métabolique permettant d'augmenter la capacité de cellules à combattre des micro-organismes contaminants sans qu'il soit nécessaire d'utiliser des antibiotiques. Plus particulièrement, l'invention porte sur des procédés d'ingénierie de cyanobactéries permettant d'utiliser de la mélamine en tant que source d'azote, de la phosphite en tant que source de phosphore, éventuellement en utilisant également NADP+ sur NAD+, et concerne également des cyanobactéries génétiquement modifiées fabriquées à l'aide desdits procédés. Dans un mode de réalisation particulier, les cellules génétiquement modifiées sont une cyanobactérie transformée par au moins une molécule polynucléotidique comprenant des gènes hétérologues de la voie d'utilisation de la mélamine, à savoir: atzD, trzE, DUR1 , 2, trzC, guaD et triA ; lesdits gènes étant fonctionnellement liés à au moins un promoteur et/ou comprenant un autre gène de phosphite déshydrogénase (ptxD ).