METHODS FOR DIFFERENTIATING PLURIPOTENT STEM CELLS IN DYNAMIC SUSPENSION CULTURE

Methods for differentiating pluripotent stem cells to neuroectoderm in dynamic suspension culture using small molecule or protein inhibitors of TGFβ/Activin/Nodal signaling and BMP signaling are provided. Also provided are methot and protocols for differentiating pluripotent stem cells such as human embryonic stem cells first to neuroectoderm, then further to glial progenitor cells, and further to oligodendrocyte progenitor cells (OPCs), and compositions obtained thereby. The methods of the present disclosure reproducibly produce neuroectoderm progenitor cells by day 7 of the differentiation process, glial progenitor cells by day 21 of the differentiation process and OPCs by day 42 of the differentiation process. L'invention concerne des méthodes de différenciation de cellules souches pluripotentes en neuroectoderme d'une culture en suspension dynamique à l'aide d'inhibiteurs à petites molécules ou protéiques de signalisation TGFβ/activine/nodale et de signalisation BMP. L'invention concerne également des méthodes et des protocoles de différenciation de cellules souches pluripotentes telles que des cellules souches embryonnaires humaines d'abord en neuroectoderme, puis en cellules progénitrices gliales et ensuite en cellules progénitrices d'oligodendrocytes (OPC), et des compositions ainsi obtenues. Les méthodes selon la présente invention produisent de manière reproductible des cellules progénitrices de neuroectoderme au jour 7 du processus de différenciation, des cellules progénitrices gliales au jour 21 du processus de différenciation et des OPC au jour 42 du processus de différenciation.