NUCLEIC ACID ISOLATION AND INHIBITOR REMOVAL FROM COMPLEX SAMPLES

The present disclosure provides methods for isolating nucleic acids from a sample, comprising: (a) contacting a sample, a lysate of the sample, a supernatant of the lysate, or a portion of the sample, the lysate or the supernatant with one or more first agents (e.g., protein precipitating agents) and one or more second agents (e.g., inhibitor removing agents) to generate a mixture, (b) separating the mixture of step (a) into a solid phase and a liquid phase, wherein the one or more second agents are primarily in the solid phase, and (c) isolating nucleic acids from the liquid phase of step (b). Compositions and kits useful in such methods are also disclosed. Further disclosed are methods, compositions and kits for preparing a lysate using a lytic reagent comprising one or more relatively mild chaotropic agents and one or more phosphates from a sample, especially a complex sample, such as a soil or stool sample. La présente invention concerne des procédés d'isolement d'acides nucléiques vis-à-vis d'un échantillon, comprenant : (a) la mise en contact d'un échantillon, d'un lysat de l'échantillon, d'une partie surnageante du lysat ou d'une partie de l'échantillon, du lysat ou de la partie surnageante avec au moins un premier agent (par exemple, des agents de précipitation de protéines) et avec au moins un second agent (par ex., des agents d'élimination d'inhibiteurs) pour produire un mélange, (b) la séparation du mélange de l'étape (a) en une phase solide et en une phase liquide, l'au moins un second agent étant principalement dans la phase solide et (c) l'isolement des acides nucléiques vis-à-vis de la phase liquide de l'étape (b). La présente invention concerne en outre des compositions et des kits utiles dans ces procédés. L'invention concerne en outre des procédés, des compositions et des kits permettant de préparer un lysat à l'aide d'un réactif lytique comprenant au moins un agent chaotropique relativement doux et au moins un phosphate à partir d'un échantillon, en particulier un échantillon complexe, tel qu'un échantillon de sol ou de selles.