DETERMINATION OF REGULATORY DNA REGIONS OF ALCOHOL DEHYDROGENASE 3 (ADH3) PROMOTER AND DESIGN OF SYNTHETIC PROMOTERS FOR RECOMBINANT PROTEIN PRODUCTION

The invention relates to the ADH3 promoter; polynucleotide sequences, vectors and expression cassettes including DNA regions responsible for the regulation of the ADH3 promoter; the host cells, including these vectors and expression cassettes, and, the recombinant proteins performed with the developed cells. In the scope of the invention, deletion analyzes in the ADH3 promoter were performed to identify regions that affect promoter strength and significant data was obtained in the formation of mutant ADH3 promoters. Deletion of the nucleotides between 539 and 638 (-361 to -262) in SEQ ID NO: 1 resulted in a 63% increase in ADH3 promoter activity. Five different synthetic promoters were created using positive regulatory regions identified and approximately 165% to 200% promoter activities were achieved with these promoters. L'invention concerne le promoteur d'ADH3; des séquences polynucléotidiques, des vecteurs et des cassettes d'expression comprenant des régions d'ADN responsables de la régulation du promoteur d'ADH3; les cellules hôtes, comprenant ces vecteurs et cassettes d'expression, et les protéines recombinantes obtenues avec les cellules développées. Dans le cadre de l'invention, des analyses de délétion dans le promoteur d'ADH3 ont été réalisées pour identifier des régions qui affectent la force du promoteur et des données significatives ont été obtenues dans la formation de promoteurs d'ADH3 mutants. La délétion des nucléotides entre 539 et 638 (-361 à -262) dans SEQ ID NO : 1 a entraîné une augmentation de 63 % de l'activité du promoteur d'ADH3. Cinq promoteurs synthétiques différents ont été créés à l'aide de régions régulatrices positives identifiées et approximativement 165 % à 200 % d'activités de promoteur ont été obtenues avec ces promoteurs.