METHODS FOR REFOLDING SUCROSE ISOMERASE

The present disclosure provides methods for refolding sucrose isomerase (SIase) of Pseudomonas mesoacidophila MX-45 from inclusion bodies. The method comprises solubilizing inclusion bodies expressed in a host cell in a solubilization solution; diluting the solubilized sucrose isomerase to obtain a...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: IYAPPAN, Saravanakumar, GAHI, Madhuri, PANDEY, Banibrata, VADLA, Pavan Kumar
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:The present disclosure provides methods for refolding sucrose isomerase (SIase) of Pseudomonas mesoacidophila MX-45 from inclusion bodies. The method comprises solubilizing inclusion bodies expressed in a host cell in a solubilization solution; diluting the solubilized sucrose isomerase to obtain a diluted sample; incubating the diluted sample in presence of a refolding buffer comprising a pH buffer, a salt moiety and a refolding agent; purifying the refolded sucrose isomerase. The invention represents an advancement over the prior art for efficient and cost-effective methods for obtaining biologically active sucrose isomerase. La présente invention concerne des procédés de repliement de saccharose isomérase (SIase) de Pseudomonas mesoacidophila MX-45 issue de corps d'inclusion. Le procédé comprend la solubilisation des corps d'inclusion exprimés dans une cellule hôte dans une solution de solubilisation ; la dilution de la saccharose isomérase solubilisée pour obtenir un échantillon dilué ; l'incubation de l'échantillon dilué en présence d'un tampon de repliement comprenant un tampon de pH, une fraction de sel et un agent de repliement ; la purification de la saccharose isomérase repliée. L'invention représente une avancée par rapport à l'état de la technique pour des procédés efficaces et rentables en vue d'obtenir une saccharose isomérase biologiquement active.