METHOD FOR MEASURING THE QUANTITY OF TWEEN 80 USING ALKALINE HYDROLYSIS OF A SAMPLE FOLLOWED BY HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY

The invention relates to methods for quantitative determination of Tween 80 in solutions of therapeutic proteins and to methods for rapid high-performance liquid chromatography. The proposed method makes it possible to significantly reduce the time for carrying out an analysis and to increase the sensitivity thereof by using isocratic reverse-phase high-performance liquid chromatography. The lower limit of detection of Tween 80 in the proposed method is 25 ng; the lower limit of the quantitative determination is 100 ng, the analytical range lies within 0.025-1.5 mg/ml of Tween 80, the recovery rate is in the range of 92.1-107.5%. L'invention concerne des procédés de détermination quantitative de polysorbate-80 dans des solutions de protéines thérapeutiques et des procédés pour de chromatographie liquide haute performance. Le procédé de l'invention permet de réduire le temps nécessaire à l'analyse et d'en améliorer la sensibilité du grâce à l'utilisation d'une chromatographie liquide isocratique haute performance en phase inverse. La limite inférieure de détection de polysorbate-80 dans le procédé proposé équivaut à 25 nanogrammes ; la limite inférieure de détection quantitative est de 100 nanogrammes, la gamme analytique est comprise entre 0,025 et 1,5 mg/ml de polysorbate-80, le degré d'extraction étant dans la gamme de 92,1-107,5%. Изобретение относится к способам количественного определения полисорбата-80 в растворах терапевтических белков и к способам быстрой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Предложенный способ позволяет значительно сократить время проведения анализа и повысить его чувствительность за счет применения изократической обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Нижний предел детектирования полисорбата-80 в предложенном способе составляет 25 нг; нижний предел количественного определения - 100 нг, аналитический диапазон лежит в границах 0,025-1,5 мг/мл полисорбата-80, степень извлечения находится в диапазоне 92,1-107,5%.