MATERIALS AND METHODS FOR ALKENE REDUCTION OF LEVOGLUCOSENONE BY AN ALKENE REDUCTASE

The subject invention concerns materials and methods for alkene reduction of compounds, such as levoglucosenone (LGO) and (,S)-Y-hydroxymethyl-a,P-butenolide (HBO), using an alkene reductase enzyme. In one embodiment, a method of the invention comprises alkene reduction of a target compound by reacting the compound with an Old Yellow Enzyme (OYE) that reduces alkene bonds. In one embodiment, the OYE is OYE 2.6 from Pichia stipites and comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1. In a specific embodiment, the enzyme is an Old Yellow Enzyme (OYE) 2.6 mutant having an amino acid substitution at position 78 in the sequence, wherein the tyrosine at position 78 is substituted with a tryptophan amino acid (Y78W) and is designated as OYE 2.6 Y78W (SEQ ID NO:2). La présente invention concerne des matériaux et des procédés de réduction des alcènes dans des composés, tels que la lévoglucosénone (LGO) et le (S)-Y-hydroxyméthyl-a,P-buténolide (HBO), à l'aide d'une enzyme alcène réductase. Dans un mode de réalisation, le procédé selon l'invention comprend la réduction des alcènes dans un composé cible par réaction du composé avec une enzyme Old Yellow (OYE) qui réduit les liaisons alcène. Dans un mode de réalisation, l'OYE est l'OYE 2,6 issue de Pichia stipites qui comprend la séquence d'acides aminés de SEQ ID No: 1. Dans un mode de réalisation spécifique, l'enzyme est une enzyme Old Yellow (OYE) 2,6 mutante portant une substitution d'acide aminé à la position 78 dans la séquence, où la tyrosine en position 78 est substituée par un acide aminé tryptophane (Y78W) et qui est dénommée OYE 2,6 Y78W (SEQ ID No: 2).