METHOD FOR PURIFICATION AND ACTIVATION OF BOTULINUM NEUROTOXIN

Disclosed herein are methods for the isolation and purification of a botulinum neurotoxin (BoNT) protein, or a polypeptide comprising a receptor binding domain of BoNT, from a solution. The method comprises contacting the solution containing the protein or polypeptide to a matrix which has attached...

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Hauptverfasser: TAO, Liang, BARKHO, Sulyman, DONG, Min
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:Disclosed herein are methods for the isolation and purification of a botulinum neurotoxin (BoNT) protein, or a polypeptide comprising a receptor binding domain of BoNT, from a solution. The method comprises contacting the solution containing the protein or polypeptide to a matrix which has attached thereto a non-toxic non-hemagglutinin (NTNHA) under conditions appropriate for binding, washing the matrix to thereby remove unbound materials, and eluting the protein or polypeptide with a solution that dissociates the bound protein from the NTNHA. Conditions appropriate for binding are a pH of less than 7.5 (e.g, 6). Conditions appropriate for dissociation are a pH greater than or equal to 7.5 (e.g., 8). Compositions specific to the methods are also disclosed. L'invention concerne des procédés d'isolement et de purification d'une protéine de neurotoxine botulique (BoNT) ou d'un polypeptide comprenant un domaine de liaison de récepteur de BoNT à partir d'une solution. Le procédé consiste à mettre en contact la solution contenant la protéine ou le polypeptide avec une matrice sur laquelle est fixée une non-hémagglutinine non toxique (NTNHA) dans des conditions appropriées pour la liaison, à laver la matrice pour éliminer ainsi les matières non liées et à éluer la protéine ou le polypeptide avec une solution qui dissocie la protéine liée de la NTNHA. Les conditions appropriées pour la liaison sont un pH inférieur à 7,5 (par exemple 6). Les conditions appropriées pour la dissociation sont un pH supérieur ou égal à 7,5 (par exemple, 8). L'invention concerne également des compositions spécifiques aux procédés.