MODIFIED 6-PHOSPHOFRUCTO-1 -KINASES, WHICH ENABLE FREMENTATIVE GROWTH OF RECOMBINANT YEAST SACCHAROMYCES CEREVISIAE CELLS ON PENTOSE SUGARS

The subject of the invention is the modified glycolytic enzyme 6-phosphofructo-1 -kinase (PFK) that will allow the yeast Saccharomyces cerevisiae cells to fermentatively grow on pentose sugars. The invention belongs to the field of genetic engineering and microbial cells and fermentations or process...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: DOLINAR, Klemen, DRAGAN, Marko, ANDREJC, Darjan, LEGISA, Matic, MOZIR, Alenka
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:The subject of the invention is the modified glycolytic enzyme 6-phosphofructo-1 -kinase (PFK) that will allow the yeast Saccharomyces cerevisiae cells to fermentatively grow on pentose sugars. The invention belongs to the field of genetic engineering and microbial cells and fermentations or processes for the synthesis of desired chemical compounds, more specifically into the field of fermentative products formation that are based on the expression of the modified genes in the host cell. The essence of the invention is a modification of the gene encoding 6-phosphofructo-1- kinase (PFK), the key regulatory enzyme, of glycolysis that determines the rate of metabolic flux through the initial part of primary metabolism. Modified gene is of human, animal, microbial origin or it is a hybrid. A consequence of modified pfk genes expression in a host cell is the formation of the shorter PFK fragments that have higher activities in respect to the native enzyme. Modified enzymes in combination with NADPH-specific malic enzyme enable the use of pentose sugars and production of fermentative products, in particular 2-phenyethanol. L'objet de l'invention est l'enzyme glycolytique modifiée 6-phosphofructo-1-kinase (PFK) qui va permettre la croissance par fermentation de cellules de levure Saccharomyces cerevisiae sur des pentoses. L'invention appartient au domaine du génie génétique et des cellules microbiennes et des fermentations ou des procédés de synthèse de composés chimiques souhaités, plus spécifiquement au domaine de la formation de produits par fermentation qui sont basés sur l'expression des gènes modifiés dans la cellule hôte. L'essence de l'invention est une modification du gène codant pour la 6-phosphofructo-1-kinase (PFK), l'enzyme régulatrice clé de la glycolyse qui détermine la vitesse du flux métabolique à travers la partie initiale du métabolisme primaire. Le gène modifié est d'origine humaine, animale, microbienne ou est un hybride. Une conséquence de l'expression de gènes pfk modifiés dans une cellule hôte est la formation de fragments PFK plus court qui présentent des activités plus élevées par rapport à l'enzyme native. Des enzymes modifiées en association avec l'enzyme malique spécifique de NADPH permettent l'utilisation de pentoses et la production de produits par fermentation, en particulier le 2-phényéthanol.