INTEGRATIVE METHOD FOR GENERATING INDUCED PLURIPOTENT STEM CELLS FOR GENE THERAPY

The present invention relates to a method of generating induced pluripotent stem cells (iPSCs), for gene therapy, from a patient-derived somatic cell line, through a one-step method combining iPSC generation factors and gene therapy factors. The method for generating genetically modified iPSCs, through the one-step, can generate gene-corrected iPSCs or disease model iPSCs having undergone mutagenesis by simultaneously introducing, into host cells, a reprogramming episomal vector, which induces the reprogramming of adult somatic cells, and a carrier for gene correction or mutagenesis. The gene-corrected or mutated iPSCs exhibit features identical with and different from other kinds of normal iPSCs, and thus can be used in screening for disease treatment cellular therapeutic agents or for therapeutic substances. La présente invention concerne un procédé de génération de cellules souches pluripotentes induites (iPSC), pour la thérapie génique, à partir d'une lignée de cellules somatiques dérivée du patient, par l'intermédiaire d'un procédé en une seule étape combinant des facteurs de génération d'iPSC et des facteurs de thérapie génique. Le procédé de génération d'iPSC génétiquement modifiées, par l'intermédiaire de l'étape unique, peut générer des iPSC porteuses de correction génique ou des iPSC modèles de maladie ayant subi une mutagenèse par introduction simultanée, dans les cellules hôtes, d'un vecteur épisomique de reprogrammation, qui induit la reprogrammation de cellules somatiques adultes, et d'un vecteur pour la correction génique ou la mutagenèse. Les iPSC porteuses de correction génique ou ayant subi une mutation présentent des caractéristiques identiques à celles d'autres types d'iPSC normales, et des caractéristiques différentes de celles d'autres types d'iPSC normales, et peuvent donc être utilisées à des fins de criblage d'agents thérapeutiques cellulaires pour le traitement d'une maladie ou de substances thérapeutiques. 본 발명은 유도만능줄기세포(induced pluripotent stem cell, iPSC) 제작 요소 및 유전자 치료 요소를 결합한 원-스텝(one-step) 방법을 통해 환자 유래 체세포주로부터 유전자 치료된 유도만능줄기세포를 제작하는 방법에 관한 것으로, 상기 원-스텝(one-step)에 의해 유전적 변형을 갖는 유도만능줄기세포(induced puripotenet stem cell, iPSC) 제조방법은 성체 체세포의 역분화를 유도하는 리프로그래밍 에피좀 벡터, 및 유전자 교정 또는 돌연변이 유발 전달체를 동시에 숙주세포로 도입하여 유전자 교정된 iPSC 또는 돌연변이 유발된 질환모델 iPSC를 제조할 수 있고, 상기 유전자가 교정되거나, 돌연변이가 유발된 iPSC가 다른 종류의 정상형의 iPSC와 동일한 특징 및 상이한 특징을 나타냄으로써 질환치료용 세포치료제 또는 치료물질의 스크리닝에 사용할 수 있다.