METHOD FOR THE DETECTION OF MULTIPLE TARGET NUCLEIC ACIDS USING CLAMPING PROBES AND DETECTION PROBES

The present invention relates to a method for the detection of target nucleic acids using clamping probes and detection probes. More specifically, the present invention relates to a method for simultaneous detection of multiple target nucleic acids using a probe mixture for real-time detection of target nucleic acids comprising at least one detection probe and at least one clamping probe for inhibiting amplification of wild type genes or unwanted genes, and a kit using the same. By using the method for detecting target nucleic acid according to the present invention, it is possible to inhibit amplification of wild type genes or unwanted genes. Also, through selective amplification and selective detection of a minute amount of target nucleic acid genes to be detected, the method allows to effectively detect single nucleotide variation, various mutations caused by loss or insertion of base, or a specific gene sequence in a sample. Also, by using multiple detection probes and multiple amplification inhibition probes, the method enables to simultaneously analyze real-time amplification curve and melting curve, which allows to not only simultaneously detect and quantify multiple target nucleic acids but also determine genotype by melting curve analysis. The probe mixture according to the present invention can detect only the target nucleic acid from a sample mixed with a large amount of unwanted genes, with high sensitivity (0.01%), thus can be very usefully used for early diagnosis requiring the detection of a trace of the target. L'invention concerne une méthode permettant de détecter des acides nucléiques cibles en utilisant des sondes de blocage et des sondes de détection. L'invention concerne plus précisément une méthode de détection simultanée de multiples acides nucléiques cibles utilisant un mélange de sondes pour détecter en temps réel des acides nucléiques cibles comprenant au moins une sonde de détection et au moins une sonde de blocage inhibant l'amplification de gènes de type sauvage ou de gènes indésirables, et un kit utilisant lesdites sondes. La méthode de détection d'acides nucléiques cibles selon l'invention permet d'inhiber l'amplification de gènes de type sauvage ou de gènes indésirables. Par amplification et détection sélectives d'une quantité infime de gènes d'acides nucléiques cibles à détecter, la méthode permet de détecter efficacement une variation nucléotidique unique, différentes mutations provoquées par la perte ou l'insertion d'une