METHODS FOR PRODUCING ANTIBODIES

The present invention describes a method for producing an antibody in Pichia pastoris, such as by fed-batch fermentation. The method includes a respiratory quotient control for monitoring the ethanol profile and to improve the quality of the antibody by, for example, eliminating clipping of the heavy chain. The method may also include a strategy of increasing the ethanol concentration to about 18-22 g/L and then maintaining the ethanol level at about 5-17 g/L to stabilize the cell mass and enhance the production rate of the antibody. The method may also include the addition of about 2.0 - 5.0 g/L of hydroxyurea during the fermentation process to sustain a constant cell density and enhance the whole broth titer of the antibody. La présente invention concerne un procédé de production d'anticorps dans Pichia pastoris, tel que par fermentation semi-discontinue. Le procédé comprend une vérification du quotient respiratoire afin de surveiller le profil d'éthanol et améliorer la qualité de l'anticorps par, notamment, une suppression du clivage de la chaîne lourde. Le procédé peut également comprendre une stratégie consistant à augmenter la concentration d'éthanol à environ 18-22 g/L puis à maintenir le taux d'éthanol à environ 5-17 g/L pour stabiliser la masse cellulaire et augmenter le taux de production de l'anticorps. Le procédé peut également comprendre l'ajout d'environ 2,0 - 5,0 g/L d'hydroxyurée pendant le processus de fermentation afin de maintenir une densité cellulaire constante et augmenter le titre total du milieu de culture de l'anticorps.