PROCESS FOR HIGH EFFICIENCY REFOLDING OF RECOMBINANT PROTEINS
A process of refolding a recombinant protein from inclusion bodies (IBs) formed inside a host cell, is provided. The process includes homogenising a wet cells slurry to obtain a cell lysate; incubating the cell lysate with a reducing agent to obtain a reduced cell lysate; isolating reduced IBs from...
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Format: | Patent |
Sprache: | eng ; fre |
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Zusammenfassung: | A process of refolding a recombinant protein from inclusion bodies (IBs) formed inside a host cell, is provided. The process includes homogenising a wet cells slurry to obtain a cell lysate; incubating the cell lysate with a reducing agent to obtain a reduced cell lysate; isolating reduced IBs from the reduced cell lysate to obtain isolated IBs; solubilising the isolated IBs with a denaturing agent to obtain solubilised IBs; and subjecting the solubilised IBs to a unit process of refolding to obtain a refolded recombinant protein.
Cette invention concerne un procédé de repliement d'une protéine recombinante à partir des corps d'inclusion (IB) qui se sont formés à l'intérieur d'une cellule hôte, le procédé comprenant l'homogénéisation d'une suspension cellulaire humide pour obtenir un lysat cellulaire; l'incubation du lysat cellulaire avec un agent réducteur pour obtenir un lysat cellulaire réduit; l'isolement des IB réduits à partir du lysat cellulaire réduit pour obtenir des IB isolés; la solubilisation des IB isolés à l'aide d'un agent dénaturant pour obtenir des IB solubilisés; et la soumission des IB solubilisés à un procédé unitaire de repliement pour obtenir une protéine recombinante repliée. |
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