REVERSIBLE MASKING OF PORE-FORMING PROTEINS FOR MACROMOLECULAR DELIVERY

The present invention features compositions and methods for enhancing endosomal escape of therapeutic agents in the cytoplasm of a cell to thereby provide more effective therapy. The endocytic pathway is the major uptake mechanism of cells, and biological agents such as proteins, DNA, and siRNA become entrapped in endosomes and subsequently degraded by lysosomal enzymes. The present invention facilitates endosomal escape by providing fusion proteins with membrane disruptive activity. In some embodiments, the fusion protein has endosomolytic activity that is activated at endosomal or lysosomal pH. In other embodiments, the fusion protein has reversible and pH sensitive membrane disruptive activity so that once internalized into the endosomal or lysosomal compartments, the resulting reduction in pH causes the pH sensitive fusion protein to activate and disrupt the endosomal or lysosomal membrane. Cette invention concerne des compositions et des méthodes permettant à des agents thérapeutiques de s'échapper plus facilement de l'endosome dans le cytoplasme d'une cellule pour augmenter l'efficacité du traitement. La voie endocytaire est le mécanisme principal de reprise cellulaire, et les agents biologiques comme les protéines, l'ADN et les ARNsi sont alors piégés dans les endosomes, puis dégradés par les enzymes lysosomiales. L'invention facilite l'échappement de l'endosome en conférant aux protéines hybrides une activité décomposant la membrane. Dans certains modes de réalisation, la protéine hybride présente une activité endosomolytique qui est activée à pH de l'endosome ou du lysosome. Dans d'autres modes de réalisation, la protéine hybride présente une activité de décomposition de la membrane réversible et sensible au pH de sorte qu'une fois internalisée dans les compartiments de l'endosome ou du lysosome, la réduction du pH qui en résulte entraîne l'activation de la protéine hybride sensible au pH et la décomposition de la membrane de l'endosome ou du lysosome.