PYRAZOLOTRIAZOLYL NUCLEOSIDE ANALOGUES AND OLIGONUCLEOTIDES COMPRISING THEM

The present invention relates to pyrazolotriazolyl nucleoside analogues, oligonucleotide comprising them, and uses thereof. Further the invention relates to a method for reducing gene expression in a cell comprising transfecting the cell with such an oligonucleotide. It has been found, in accordance with the present invention, that certain pyrazolotriazolyl-based nucleoside analogues such as 8-[3'-(2-cyanoethyl)-(N,Ndiisopropyl)]-phosphoramidite- (2'-deoxy-5'-dimethoxytri ty 1-13-D-ri bofuranozyl)-4-{N-benzoylamino)-pyrazolo [1,5a]-1,3,5-triazine, can be incorporated into oligonucleotides, substituting natural purine nucleosides and imparting acid stability and nuclease stability to the oligonucleotide. Furthermore, oligonucleotides comprising one or more such nucleoside analogues are capable of hybridizing with oligonucleotides having complementary sequences thereto in which no such analogues are incorporated. La présente invention concerne des analogues de pyrazolotriazolyl-nucléosides, des oligonucléotides les comprenant, et leurs utilisations. L'invention concerne en outre un procédé pour réduire l'expression génique dans une cellule consistant à transfecter la cellule avec un oligonucléotide de ce type. Selon l'invention, il s'avère que certains analogues de nucléosides à base de pyrazolotriazolyle, telle la 8-[3'-(2-cyanoéthyl)-(N,N-diisopropyl)]-phosphoramidite-(2'-désoxy-5'-diméthoxytrityl-beta-D-ribofuranozyl)-4-(N-benzoylamino)-pyrazolo[1,5a]-1,3,5-triazine, peuvent être incorporés dans les oligonucléotides, de sorte qu'ils se substituent aux nucléosides puriques naturels et confèrent à l'oligonucléotide une stabilité aux acides et une stabilité aux nucléases. En outre, des oligonucléotides comprenant un ou plusieurs analogues de nucléosides de ce type peuvent s'hybrider avec des oligonucléotides ayant des séquences complémentaires de ceux-ci sans incorporation d'analogues de ce type.