METHODS FOR REFOLDING G-CSF FROM INCLUSION BODIES

New methods for the refolding of recombinant granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) from inclusion bodies are disclosed. The methods comprise two refolding steps. In particular, the methods comprise the solubilising of G-CSF with a solubilising agent, the oxidative refolding (first refolding...

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Hauptverfasser: BALLAGI, ANDRAS, BECSI, JANOS, FELFOELDI, FERENC
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:New methods for the refolding of recombinant granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) from inclusion bodies are disclosed. The methods comprise two refolding steps. In particular, the methods comprise the solubilising of G-CSF with a solubilising agent, the oxidative refolding (first refolding step) of G-CSF in the presence of the solubilising agent and an oxidizing agent, the efficient removal of the solubilising agent, and a second refolding step to complete the folding of G-CSF in the absence of the solubilising agent. Various methods are described for the efficient removal of the solubilising agent from partially refolded G-CSF. L'invention concerne de nouveaux procédés de repliement du facteur de stimulation des colonies de granulocytes (G-CSF) recombinant à partir de corps d'inclusion. Ces procédés comprennent deux étapes de repliement. Lesdits procédés comprennent en particulier la solubilisation du G-CSF avec un agent solubilisant, le repliement oxydatif (première étape de repliement) du G-CSF en présence de l'agent solubilisant et d'un agent oxydant, le retrait efficace de l'agent solubilisant, ainsi qu'une deuxième étape de repliement pour terminer le repliement du G-CSF en l'absence de l'agent solubilisant. Divers procédés sont décrits pour retirer efficacement l'agent solubilisant du G-CSF partiellement replié.