METHOD AND APPARATUS FOR IMAGING A STRUCTURE MARKED WITH A FLUORESCENT DYE

In a method for imaging a structure (33) marked with a fluorescent dye in a sample, the sample is repeatedly scanned in a scanning range (28) with a light intensity distribution localised around a focal point (29) of a focused fluorescence excitation light beam. The light intensity distribution further comprises a focused fluorescence inhibiting light beam (7) whose wave fronts are modulated so that a fluorescence inhibiting light intensity distribution comprises a minimum at the focal point (29) of the fluorescence excitation light beam (4). The scanning conditions are coordinated in such a way that the fluorescence light is emitted out of the scanning range (28) as individually detectable photons. When these photons are detected, the location (32) of the focal point (28) at the respective point in time is allocated to them. An image of the structure (33) is composed of the locations (32) to which the detected photons have been allocated during several repetitions of scanning the scanning range (28). Dans un procédé permettant d'imager une structure (33) marquée avec un colorant fluorescent dans un échantillon, l'échantillon est examiné par balayage de façon répétée dans une plage de balayage (28), la répartition de l'intensité lumineuse étant localisée autour du foyer (29) d'un faisceau lumineux focalisé d'excitation de fluorescence. La répartition de l'intensité lumineuse comprend en outre un faisceau lumineux focalisé empêchant la fluorescence (7) dont les fronts d'onde sont modulés de sorte qu'une répartition de l'intensité lumineuse empêchant la fluorescence comprend un minimum au niveau du foyer (29) du faisceau lumineux d'excitation de fluorescence (4). Les conditions de balayage sont coordonnées de manière à ce que la lumière de fluorescence soit émise à partir de la plage de balayage (28) en tant que photons individuellement détectables. Lorsque ces photons sont détectés, l'emplacement (32) du foyer (28) à l'instant respectif leur est alloué. Une image de la structure (33) est constituée des emplacements (32) auxquels les photons détectés ont été alloués au cours de plusieurs répétitions du balayage de la plage de balayage (28).