FLUORESCENT MOLECULAR PROBES FOR USE IN ASSAYS THAT MEASURE TEST COMPOUND COMPETITIVE BINDING WITH SAM-UTILIZING PROTEINS

Assay methods may generally comprise forming homogeneous assay mixtures comprising target SAM-utilizing protein, fluorescent detection analyte, and test compound, incubating, and measuring FP or TR-FRET signal emitted in order to determine a measure of test compound-SAM-utilizing protein binding. Assay mixtures comprise a SAM-utilizing protein, and a fluorescent detection analyte that binds with the SAM-utilizing protein in the absence of test compound. Assay mixtures may further comprise a test compound. Assay mixture embodiments may generate FP or TR-FRET signal properties that are a function of the inherent binding interactions of both the test compound and the detection analyte with the SAM- utilizing protein. Fluorescent detection analytes comprise a fluorophore moiety, a covalent linker moiety, and a SAM-utilizing protein ligand moiety and could be utilized in FP or TR-FRET assays to measure test compound binding. L'invention concerne des méthodes de dosage qui peuvent généralement consister à former des mélanges de dosages homogènes comprenant une protéine cible utilisant SAM, un analyte de détection fluorescent et un composé test, à les incuber et à mesurer un signal FP ou TR-FRET émis afin de déterminer une mesure de la liaison des protéines utilisant SAM et du composé test. Des mélanges de dosages comprennent une protéine utilisant SAM, et un analyte de détection fluorescent qui se lie à la protéine utilisant SAM en l'absence de composé test. Des mélanges de dosages peuvent également comprendre un composé test. Des modes de réalisation de mélanges de dosages peuvent générer des propriétés de signal FP ou TR-FRET qui sont fonction d'interactions de liaisons inhérentes à la fois du composé test et de l'analyte de détection avec la protéine utilisant SAM. Des analytes de détection fluorescents comprennent une fraction fluorophore, une fraction covalente de lieur et une fraction de ligand de la protéine utilisant SAM et peuvent être utilisés dans des dosages par FP ou TR-FRET afin de mesurer la liaison du composé test.