PRIMER BEADS

Non-polar, hydrophobic beads and methods to reversibly bind, normalize, store and in situ deliver primers to reactions including PCR. Also provided are instructions for preparing the beads. In the presence of an appropriate binding buffer, a bead can be used to bind and desalt primers from a crude solution of DMT-off primers. In the presence of an appropriate binding buffer, a bead can be used to bind and purify primers from a crude solution of DMT-on primers. A bead may bind a picomolar amount of DMT-on primers from a solution containing a plurality of crude DMT-on primers. Upon detritylation and washing, the resulting DMT-off primer bound bead may be used in PCR. Primers are released from the bead upon cycling the temperature. Primer bound beads are coated or silanized with hydrophobic reagents which ensures a gradual release of primers during the thermal cycling of the PCR reaction. Coating or silanization in turn enhances primer stability and long term storage. L'invention porte sur des perles hydrophobes non polaires et sur des procédés de liaison réversible, de normalisation, de stockage et de livraison in situ d'amorces à des réactions comprenant une PCR. Elle porte aussi sur des instructions concernant la préparation des perles. En présence d'un tampon de liaison appropriée, une perle peut être utilisée pour lier et dessaler des amorces, à partir d'une solution brute d'amorces sans DMT. En présence d'un tampon de liaison approprié, une perle peut être utilisée pour lier et purifier les amorces à partir d'une solution brute d'amorces avec DMT. Une perle peut lier une quantité picomolaire d'amorces avec DMT à partir d'une solution contenant une pluralité d'amorces brutes avec DMT. Après détritylation et lavage, la perle obtenue, liée à une amorce sans DMT, peut être utilisée dans une PCR. Les amorces sont libérées de la perle après cyclage de la température. Les perles liées à l'amorce sont revêtues ou silanées avec des réactifs hydrophobes, ce qui assure une libération progressive des amorces pendant le cyclage thermique de la réaction PCR. Le revêtement ou la silanation, pour sa part, renforce la stabilité et le stockage à long terme des amorces.