USE OF ACHROMOPEPTIDASE FOR LYSIS AT ROOM TEMPERATURE

A process for detecting the presence or absence of gram-positive bacteria in a biological sample. The biological sample can be obtained from any mammal and contains, at a minimum, cellular components. The sample is combined with an enzymatic lysing agent such as achromopeptidase, and lysed at room t...

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Hauptverfasser: HILLIGOSS, DANIELLE, RAMADAN, SAMAH, HELLYER, TOBIN, J, KELLER, LISA, M, COADY, JAMIE
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:A process for detecting the presence or absence of gram-positive bacteria in a biological sample. The biological sample can be obtained from any mammal and contains, at a minimum, cellular components. The sample is combined with an enzymatic lysing agent such as achromopeptidase, and lysed at room temperature. Ferric oxide is then added to the sample containing achromopeptidase. A magnetic field is applied to the sample and nucleic acids are extracted from the cellular components. Target nucleic acids, if present, are amplified using techniques such as Polymerase Chain Reaction (PCR) and then used to detect the presence or absence of gram-positive bacteria. Staphylococcus aureus and Streptococcus agalactiae are examples of target bacteria detected by the methods of the present invention. L'invention concerne un procédé de détection de la présence ou de l'absence de bactéries à Gram positif dans un échantillon biologique. L'échantillon biologique peut être obtenu auprès de tout mammifère et contient, au minimum, des composants cellulaires. L'échantillon est combiné avec un agent de lyse enzymatique tel qu'une achromopeptidase, et lysé à température ambiante. De l'oxyde ferrique est ensuite ajouté à l'échantillon contenant une achromopeptidase. Un champ magnétique est appliqué à l'échantillon et des acides nucléiques sont extraits des composants cellulaires. Les acides nucléiques cibles, s'ils sont présents, sont amplifiés en utilisant des techniques telles que la réaction en chaîne par polymérase (PCR), puis utilisés pour détecter la présence ou l'absence de bactéries à Gram positif. Staphylococcus aureus et Streptococcus agalactiae sont des exemples de bactéries cibles détectées par les procédés de la présente invention.