METHOD OF MAKING NUCLEIC ACID LIBRARIES

A method of preparing a nucleic acid library in droplets in contact with oil, including: (a) blunt-ending nucleic acid fragments in a droplet in the oil to yield blunt-ended nucleic acid fragments; (b) phosphorylating the blunt-ended nucleic acid fragments in a droplet in the oil to yield phosphoryl...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: SMITH, GREGORY, F, POLLACK, MICHAEL, G, DHOPESHWARKAR, RAHUL, LINNARTZ, PETER, ECKHARDT, ALLEN, E, SRINIVASAN, VIJAY, NORTON, SCOTT, THWAR, PRASANNA, ROUSE, JEREMY, YI, UICHONG, TROTTA, NICHOLAS, SUDARSAN, ARJUN
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:A method of preparing a nucleic acid library in droplets in contact with oil, including: (a) blunt-ending nucleic acid fragments in a droplet in the oil to yield blunt-ended nucleic acid fragments; (b) phosphorylating the blunt-ended nucleic acid fragments in a droplet in the oil to yield phosphorylated nucleic acid fragments; coupling A-tails to the phosphorylated nucleic acid fragments in a droplet in the oil to yield A-tailed nucleic acid fragments; and (d) coupling nucleic acid adapters to the A-tailed nucleic acid fragments in a droplet in the oil to yield the nucleic acid library comprising adapter-ligated nucleic acid fragments. La présente invention concerne un procédé de préparation d'une banque d'acide nucléique dans des gouttelettes en contact avec de l'huile, qui comprend : (a) la formation d'extrémités franches aux fragments d'acide nucléique dans une gouttelette dans l'huile pour donner des fragments d'acide nucléique à extrémités franches ; (b) la phosphorylation des fragments d'acide nucléique à extrémités franches dans une gouttelette dans l'huile pour donner des fragments d'acide nucléique phosphorylés ; (c) le couplage des queues A aux fragments d'acide nucléique phosphorylés dans une gouttelette dans l'huile pour donner des fragments d'acide nucléique à queue A ; et (d) le couplage des adaptateurs d'acide nucléique aux fragments d'acide nucléique à queue A dans une gouttelette dans l'huile pour donner la banque d'acide nucléique comprenant des fragments d'acide nucléique ligaturés aux adaptateurs.