CLONING, EXPRESSION AND USE OF ACID PHOSPHOLIPASES

Die Erfindung betrifft eine DNA-Sequenz, die ein Polypeptid mit Phospholipaseaktivität im Wesentlichen ohne Lipaseaktivität kodiert, dadurch gekennzeichnet, dass die DNA- Sequenz ausgewählt ist aus a) DNA-Sequenzen, die eine Nukleotidsequenz gemäß SEQ ID NO: 1 umfassen, b) DNA-Sequenzen, die die kod...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: PALADINO, SILVIA, NGUYEN, QUOC, KHANH, SCHWARZ, TATIANA, TITZE, KORNELIA
Format: Patent
Sprache:eng ; fre ; ger
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Beschreibung
Zusammenfassung:Die Erfindung betrifft eine DNA-Sequenz, die ein Polypeptid mit Phospholipaseaktivität im Wesentlichen ohne Lipaseaktivität kodiert, dadurch gekennzeichnet, dass die DNA- Sequenz ausgewählt ist aus a) DNA-Sequenzen, die eine Nukleotidsequenz gemäß SEQ ID NO: 1 umfassen, b) DNA-Sequenzen, die die kodierende Sequenz gemäß SEQ ID NO: 1 umfassen, c) DNA-Sequenzen, die die Proteinsequenz gemäß SEQ ID NO: 2 kodieren, d) DNA-Sequenzen, die von dem Plasmid pPL3940-Topo2.5 mit der Restriktionskarte gemäß Figur 7 und hinterlegt unter der Hinterlegungsnummer DSM 22741 kodiert werden, e) DNA-Sequenzen, die unter stringenten Bedingungen mit einer der DNA-Sequenzen gemäß a), b), c) oder d) hybridisieren, f) DNA-Sequenzen, die aufgrund der Degenehertheit des genetischen Codes mit den DNA-Sequenzen gemäß a), b), c), d) oder e) verwandt sind, und g) komplementären Strängen zu den Sequenzen gemäß a) bis f), wobei die DNA-Sequenz bevorzugt aus Aspergillus und noch bevorzugter aus Aspergillus fumigatus abgeleitet ist sowie ein Polypeptid mit Phospholipaseaktivität im Wesentlichen ohne Lipaseaktivität ausgewählt aus a) einem Polypeptid, das von dem kodierenden Teil einer DNA-Sequenz wie vorstehend definiert kodiert wird, b) einem Polypeptid mit der Sequenz gemäß SEQ ID NO: 2 oder einer davon abgeleiteten Sequenz, die durch Substitution, Addition, Deletion einer oder mehrerer Aminosäuren daraus erhältlich ist, c) einem Polypeptid mit einer Sequenz, die mindestens 83% Identität zu den Aminosäuren 1 bis 299 von SEQ ID NO: 2 aufweist, d) einem Polypeptid, das von einer Nukleinsäuresequenz kodiert wird, die unter stringenten Bedingungen hybridisiert mit (i) den Nukleotiden 55 bis 1106 von SEQ ID NO: 1, (ii) der in den Nukleotiden 55 bis 1 106 von SEQ ID NO: 1 enthaltenen cDNA-Sequenz, (iii) einer Teilsequenz von (i) oder (ii) aus mindestens 100 Nukleotiden, oder (iv) einem Komplementärstrang von (i), (ii) oder (iii), e) einer Variante des Polypeptids mit SEQ ID NO: 2 umfassend eine Substitution, Deletion und/oder Insertion von einer oder mehreren Aminosäuren, f) allelischen Varianten zu den Aminosäuresequenzen a) bis e). The invention relates to a DNA sequence, which codes for a polypeptide having phospholipase activity essentially without lipase activity, characterized in that the DNA sequence is selected from a) DNA sequences that comprise a nucleotide sequence according to SEQ ID No: 1, b) DNA sequences that comprise the coding sequence according to SEQ ID NO: 1, c) DNA sequence