A METHOD OF REMOVING NUCLEIC ACID CONTAMINATION IN REVERSE TRANSCRIPTION AND AMPLIFICATION REACTIONS

The invention provides methods of removing nucleic acid contamination from reverse transcription reactions and hot-start PCR, wherein said hot-start PCR is a barrier hot-start PCR set up and/or involves a hot-start DNA polymerase, which methods comprise use of a DNase that is substantially irreversi...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser:	ELDE, MORTEN, GJELLESVIK, DAG, RUNE, LANES, OLAV
Format:	Patent
Sprache:	eng ; fre
Schlagworte:	BEER BIOCHEMISTRY CHEMISTRY COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR COMPOSITIONS THEREOF CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES CULTURE MEDIA ENZYMOLOGY MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS METALLURGY MICROBIOLOGY MICROORGANISMS OR ENZYMES MUTATION OR GENETIC ENGINEERING PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS SPIRITS VINEGAR WINE
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Beschreibung
Zusammenfassung:	The invention provides methods of removing nucleic acid contamination from reverse transcription reactions and hot-start PCR, wherein said hot-start PCR is a barrier hot-start PCR set up and/or involves a hot-start DNA polymerase, which methods comprise use of a DNase that is substantially irreversibly inactivated by heating at a temperature of about 5O0C for 5 minutes, and that is substantially specific for double stranded DNA. The invention further provides a DNase that is substantially irreversibly inactivated by heating at a temperature of about 5O0C for 5 minutes, and that is substantially specific for double stranded DNA, nucleic acids encoding said DNase and kits or compositions comprising said DNase or said nucleic acid. L'invention porte sur des procédés d'élimination d'une contamination par acide nucléique à partir de réactions de transcription inverse et de PCR à démarrage à chaud, ladite PCR à démarrage à chaud étant une configuration de PCR à démarrage à chaud à barrière et/ou mettant en jeu une ADN polymérase à démarrage à chaud, lesdits procédés comprenant l'utilisation d'une DNase qui est sensiblement inactivée de façon irréversible par chauffage à une température d'environ 50°C pendant 5 minutes, et qui est sensiblement spécifique pour de l'ADN double brin. L'invention porte en outre sur une DNase qui est sensiblement inactivée de façon irréversible par chauffage à une température d'environ 50°C pendant 5 minutes, et qui est sensiblement spécifique pour de l'ADN double brin, sur des acides nucléiques codant pour ladite DNase et sur des coffrets ou compositions comprenant ladite DNase ou ledit acide nucléique.