COVALENT COMPLEXES OF LIPASES WITH PROTEINS, DNA PROBES, COFACTORS OR OTHER BIOMOLECULES

The invention relates to complexes that include lipases covalently bonded, by means of regions not involved in the active centre thereof, to biomolecules of interest (proteins such as enzymes, antibodies or proteins A or G, cofactors or DNA probes). The complexes can be immobilised via the intact active centre of the lipases on all types of hydrophobic media, without requiring any modifications or activations thereof. The bonding of the lipase to the hydrophobic media is reversible, allowing the reversible immobilisation of the complexes. The invention provides two methods, chemical and biological, for preparing said complexes, as well as a method for immobilising said complexes. Said immobilised complexes can be used in industry, in laboratories or in diagnostics, given the potential use thereof as biocatalysts or as biosensors. The chemical method includes adsorbing the lipase to a porous hydrophobic medium, combining the lipase thus adsorbed with the biomolecule, and desorbing said complex from the medium using detergents. The biological method includes inserting the gene of the biomolecule in a plasmid containing the gene of the lipase, in a microorganism, in order for the latter to express the lipase fused with the biomolecule. The reversible immobilisation of the complexes generated using either of the two methods can be carried out on non-porous hydrophobic media. Complejos que comprenden lipasas unidas covalentemente, a través de regiones no involucradas en su centro activo, a biomoléculas de interés (proteínas, como enzimas, anticuerpos o proteínas A o G, cofactores o sondas de ADN). Los complejos se pueden inmovilizar a través del centro activo intacto de las lipasas sobre todo tipo de soportes hidrofóbicos sin necesidad de realizar modificaciones o activaciones en los mismos. La unión de la lipasa a los soportes hidrofóbicos es reversible, lo que permite la inmovilización reversible de los complejos. La invención proporciona dos métodos, químico y biológico, de preparación de estos complejos y un método de inmovilización de los mismos. Estos complejos inmovilizados pueden tener aplicaciones en la industria, en el laboratorio o en diagnóstico, debido a su uso potencial como biocatalizadores o como biosensores. El método químico comprende la adsorción de la lipasa a un soporte hidrofóbico poroso, la conjugación de la lipasa así adsorbida con la biomolécula y desorber este complejo del soporte mediante el uso de detergentes. El método biológico com