PROBE COMPOUND FOR DETECTING AND ISOLATING ENZYMES AND MEANS AND METHODS USING THE SAME

The present invention relates to a probe compound that can comprise any substrate or metabolite of an enzymatic reaction in addition to an indicator component, such as, for example, a fluorescence dye, or the like. Moreover, the present invention relates to means for detecting enzymes in form of an...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: CHERNIKOVA, TATYANA, GUAZZARONI, MARIA, E, FERNANDEZ, VICTOR, M, FERRER, MANUEL, TIMMIS, KENNETH, N, VIEITES, JOSE, M, WALICZEK, AGNES, GOLYSHIN, PETER, N, BELOQUI, ANA, PAZOS, FLORENCIO, DE LACEY, ANTONIO, LOPEZ, GOLYSHINA, OLGA, V
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:The present invention relates to a probe compound that can comprise any substrate or metabolite of an enzymatic reaction in addition to an indicator component, such as, for example, a fluorescence dye, or the like. Moreover, the present invention relates to means for detecting enzymes in form of an array, which comprises any number of probe compounds of the invention which each comprise a different metabolite of interconnected metabolites representing the central pathways in all forms of life. Moreover, the present invention relates to a method for detecting enzymes involving the application of cell extracts or the like to the array of the invention which leads to reproducible enzymatic reactions with the substrates. These specific enzymatic reactions trigger the indicator (e.g. a fluorescence signal) and bind the enzymes to the respective cognate substrates. Moreover, the invention relates to means for isolating enzymes in form of nanoparticles coated with the probe compound of the invention. The immobilisation of the cognate substrates or metabolites on the surface of nanoparticles by means of the probe compounds allows capturing and isolating the respective enzyme, e.g. for subsequent sequencing. La présente invention concerne un composé sonde qui peut comprendre un substrat ou un métabolite quelconque pour une réaction enzymatique en plus d'un composant indicateur, comme, par exemple, un colorant fluorescent ou un composant similaire. En outre, la présente invention concerne un moyen pour détecter des enzymes, sous forme d'un réseau, qui comprend un nombre quelconque de composés sondes de l'invention, chacun comprenant un métabolite différent de métabolites interconnectés représentant les voies centrales de toutes les formes de vie. En outre, la présente invention concerne un procédé de détection d'enzymes impliquant l'application d'extraits cellulaires ou de substances similaires sur le réseau de l'invention, qui permet des réactions enzymatiques reproductibles avec les substrats. Ces réactions enzymatiques spécifiques activent l'indicateur (par exemple un signal fluorescent) et lient les enzymes aux substrats correspondants respectifs. En outre, l'invention concerne un moyen pour isoler des enzymes, sous forme de nanoparticules recouvertes du composé sonde de l'invention. L'immobilisation des substrats ou des métabolites correspondants sur la surface des nanoparticules au moyen des composés sondes permet la capture et l'isolement de l'enzyme respecti