SCREENING METHOD FOR THE IDENTIFICATION OF TNF-PATHWAY MODULATORS USING TRADD /REPORTER FUSION PROTEIN

The present invention relates inter alia to methods for identifying modulators of tumour necrosis factor (TNF) signalling. In one aspect, the method involves identifying an agent that modulates a signalling pathway mediated by TNF, comprising the steps of providing a host cell comprising TNF receptor 1 (TNFR1)-associated death domain (TRADD) linked to a reporter molecule, and determining at least one cellular characteristic detectable by the reporter molecule in the host cell in the presence of TNF and in the presence and absence of a candidate modulator. The invention is suitable for high-throughput screening (HTS) and high-content screening (HCS), or a combination of HTS and HCS. La présente invention concerne, entre autres choses, des procédés permettant d'identifier des modulateurs de la signalisation du facteur de nécrose tumorale ou "TNF" (Tumour Necrosis Factor). Dans un aspect, le procédé implique l'identification d'un agent qui module un chemin de signalisation médié par le TNF. Dans un premier temps, le procédé consiste à prendre une cellule hôte comportant un domaine TRADD lié à une molécule rapporteuse, le domaine TRADD étant le domaine de mort associé au récepteur 1 du TNF. Dans un deuxième temps, le procédé consiste à déterminer au moins une caractéristique cellulaire détectable par la molécule rapporteuse dans la cellule hôte en présence de TNF et en présence et en absence d'un candidat modulateur. L'invention convient au criblage à haut rendement ou "HTS" (High-Throughput Screening) et au criblage des hautes teneurs ou "HCS" (High-Content Screening) ou à une combinaison des deux.