METHOD AND DEVICE FOR MEASURING THE ACTIVITY OF ENZYMES AFTER INHIBITOR REMOVAL

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Bestimmung der Aktivität von Enzymen in einer Messprobe, die wenigstens ein Enzym und wenigstens einen zu dem Enzym korrespondierenden Enzyminhibitor enthält, indem nach Entzug des Inhibitors das befreite Enzym in seiner Aktivität dadurch gemessen...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: MEIER, HANS JOERG, HOFER, HANS WERNER
Format: Patent
Sprache:eng ; fre ; ger
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Beschreibung
Zusammenfassung:Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Bestimmung der Aktivität von Enzymen in einer Messprobe, die wenigstens ein Enzym und wenigstens einen zu dem Enzym korrespondierenden Enzyminhibitor enthält, indem nach Entzug des Inhibitors das befreite Enzym in seiner Aktivität dadurch gemessen wird, dass der Messprobe ein Substrat zugeführt wird und der zeitliche Verlauf der Konzentration zumindest eines Reaktionsprodukts (Spaltprodukts) erfasst wird und das enzymspezifische Substrat ein Fluorogen trägt, welches bei der enzymatischen Reaktion abgespalten wird und dessen Fluoreszenz (Messparameter) in einem Wellenlängenbereich detektiert werden kann, wo der Messparameter eindeutig der zu messenden Enzymaktivität zugeordnet werden kann, wobei der Entzug des Inhibitors durch Eintauchen eines festen Trägers, an welchem die Inhibitorbindesubstanz fixiert ist, in die Messprobe erfolgt. Die vorliegende Erfindung betrifft ebenfalls eine entsprechende Vorrichtung zur Bestimmung der Aktivität von Enzymen in einer Messprobe. The present invention relates to a method for determining the activity of enzymes in a measurement sample comprising at least one enzyme and at least one enzyme inhibitor corresponding to the enzyme, wherein the released enzyme is measured in the activity thereof after removal of the inhibitor, in that a substrate is added to the measurement sample and the change in concentration over time of at least one reaction product (decomposition product) is captured and the enzyme-specific substrate carries a fluorogen that is split off in the enzyme reaction and the fluorescence thereof can be detected in a wavelength range, where the measurement parameter can be uniquely associated with the enzyme activity to be measured, wherein the removal of the inhibitor takes place by immersing into the measurement sample a solid carrier on which the inhibitor bonding substance is fixed. The present invention further relates to a corresponding device for determining the activity of enzymes in a measurement sample. L'invention concerne un procédé destiné à la détermination de l'activité d'enzymes dans un échantillon qui contient au moins une enzyme et au moins un inhibiteur d'enzyme correspondant à cette enzyme. Après extraction de l'inhibiteur, l'activité de l'enzyme libérée est mesurée en ce qu'un substrat est associé à l'échantillon, le déroulement temporel de la concentration d'au moins un produit réactionnel (produit de séparation) est saisi, le substrat