YEAST-BASED METHODS OF IDENTIFYING NUCLEIC ACIDS AND COMPOUNDS FOR TREATING NEURODEGENERATIVE DISEASES

The disclosure encompasses methods for the screening of small molecules or nucleic acids that may reverse the inhibition of growth of the unicellular yeast Schizosaccharomyces pombe by rotenone. The use of a yeast as the screening target allows for the high-throughput screening of small molecule and nucleic acid libraries for candidates that may then be screened in animal models as therapeutic agents for the treatment of neurodegenerative diseases. The plant-derived isoflavonoid, rotenone, while only moderately inhibitory to S. pombe cell growth on complex rich medium, is highly inhibitory to growth on synthetic minimal medium. S. pombe cells carrying a deletion in the gene pmk1 are hypersensitive to rotenone. S. pombe, therefore, provides a model for elucidating complex 1-independent targets of rotenone, and can serve as a screening tool for identifying compounds or oligonucleotides potentially able to reverse the effects of rotenone or Parkinson's disease in animal or human subjects. La présente invention concerne des procédés de criblage de petites molécules ou d'acides nucléiques qui peuvent inverser l'inhibition de la croissance de la levure unicellulaire Schizosaccharomyces pombe par la roténone. L'utilisation d'une levure en tant que cible de criblage permet le criblage à grand rendement de banques de petites molécules et d'acides nucléiques à la recherche de candidats qui peuvent ensuite être criblés dans des modèles animaux en tant qu'agents thérapeutiques pour le traitement de maladies neurodégénératives. L'isoflavonoïde dérivé de plantes roténone, même s'il n'inhibe que modérément la croissance cellulaire de S. pombe sur un milieu complexe riche, inhibe fortement la croissance sur un milieu synthétique minimum. Les cellules de S. pombe portant une délétion dans le gène pmk1 sont hypersensibles à la roténone. S. pombe offre par conséquent un modèle d'élucidation des cibles de la roténone indépendantes du complexe 1, et peut servir d'outil de criblage pour l'identification de composés ou d'oligonucléotides potentiellement capables d'inverser les effets de la roténone ou de la maladie de Parkinson chez les sujets animaux ou humains.