VECTOR FOR IDENTIFICATION, SELECTION AND EXPRESSION OF RECOMBINANTS

A modified vector comprising a reporter gene having a STOP codon upstream of the multiple cloning site of the vector which is characterized in that the recombinant clones show fluoresce or show color in presence of inducer. A method for identification and selection of recombinant clones comprising the modified vector wherein the recombinant clones florescence or show color in a suitable suppressor strain of the STOP codon associated with the gene of interest. A method of preparation of recombinant clone comprising gene of interest and modified vector comprising amplification of gene of interest using specific primers containing STOP codon different from STOP codon used with reporter gene;cloning the amplified gene of interest in the modified vector; transformation of cloned modified vector in the STOP codon suppressor host cell wherein the STOP codon suppressor host cell is specific for STOP codon used with the gene of interest wherein the recombinant clones either fluorescence or show color depending upon the reporter gene used. La présente invention concerne un vecteur modifié comprenant un gène rapporteur ayant un codon STOP en amont du site de clonage multiple du vecteur qui est caractérisé en ce que les clones recombinants présentent une fluorescence ou présentent une couleur en présence d'un inducteur. La présente invention concerne également un procédé d'identification et de sélection de clones recombinants comprenant le vecteur modifié, les clones recombinants présentant une fluorescence ou une couleur dans une souche suppresseur adaptée du codon STOP associé au gène d'intérêt. La présente invention concerne en outre procédé de préparation d'un clone recombinant comprenant un gène d'intérêt et un vecteur modifié qui comprend l'amplification du gène d'intérêt à l'aide d'amorces spécifiques contenant un codon STOP différent du codon STOP utilisé avec le gène rapporteur; le clonage du gène d'intérêt amplifié dans le vecteur modifié; la transformation du vecteur modifié cloné dans la cellule hôte suppresseur de codon STOP, la cellule hôte suppresseur de codon STOP étant spécifique d'un codon stop utilisé avec le gène d'intérêt, les clones recombinants montrant une fluorescence ou une couleur selon le gène rapporteur utilisé.