EXPRESSION OF HETEROLOGOUS PROTEINS IN BACTERIAL SYSTEM USING A GM-CSF FUSION TAG

Fusion tag comprising C terminus amino acids of human Granulocyte Macrophage Colony Simulating Factor (GM-CSF), START codon and enterokinase cleavage site and adapted to express other wise non expressible genes. A process for formation of the fusion tag comprising amplification of C terminus 45 amino acids from a full length human GM-CSF synthetic gene using gene specific forward primers which contains specific restriction site for providing START codon, and reverse primer containing sequences corresponding to enterokinase cleavage site, Fusion protein comprising fusion tag towards the N terminus, said fusion tag comprising C terminus amino acids of human Granulocyte Macrophage Colony Simulating Factor (GM-CSF), START codon and enterokinase cleavage site and adapted to express other wise non expressible genes, and non GM peptide towards the C-terminus. A method of producing the fusion protein, comprising transforming a host cell with the DNA expression vector as defined in and expressing said fusion protein. A method of purifying or isolating the fusion protein, using affinity chromatography to purify or isolate the fusion protein.An expression vector comprising a DNA sequence coding for a fusion protein said fusion protein comprising a fusion tag being capable of being used in N- terminus tagging, wherein the fusion tag has the 45 amino acid of human GM-CSF, START codon and enterokinase cleavage site. L'invention concerne une étiquette de fusion comportant des acides aminés de terminaison C du facteur de stimulation humain de colonies de macrophages et de granulocytes (GM-CSF), un codon START et un site de clivage à l'entérokinase et qui est adaptée pour exprimer d'autres gènes wise non exprimables. L'invention concerne également un procédé de formation de l'étiquette de fusion qui comprend l'amplification des acides aminés 45 de terminaison C à partir d'un gène synthétique de GM-CSF humain pleine longueur utilisant des amorces avant spécifiques au gène qui contient un site de restriction spécifique destiné à fournir le codon START, et des séquences contenant une amorce inverse correspondant au site de clivage à l'entérokinase, une protéine de fusion comportant l'étiquette de fusion en direction de la terminaison N, ladite étiquette de fusion comportant des acides aminés à terminaison C du facteur de stimulation humain de colonies de macrophages et de granulocytes (GM-CSF), un codon START et un site de clivage à l'entérokinase et étant adaptée pour exprim