3D BIPLANE MICROSCOPY

A microscopy system is configured for creating 3D images from individually localized probe molecules. The microscopy system includes a sample stage, an activation light source, a readout light source, a beam splitting device, at least one camera, and a controller. The activation light source activates probes of at least one probe subset of photo-sensitive luminescent probes, and the readout light source causes luminescence light from the activated probes. The beam splitting device splits the luminescence light into at least two paths to create at least two detection planes that correspond to the same or different number of object planes of the sample. The camera detects simultaneously the at least two detection planes, the number of object planes being represented in the camera by the same number of recorded regions of interest. The controller is programmable to combine a signal from the regions of interest into a 3D data. L'invention concerne un système de microscopie configuré pour créer des images en 3D à partir de molécules de sonde localisées séparément. Le système de microscopie comprend un porte-échantillons, une source de lumière d'activation, une source de lumière de lecture, un dispositif de division de faisceaux, au moins une caméra et un contrôleur. La source d'activation de lumière active les sondes d'au moins un sous-ensemble de sondes luminescentes photosensibles et la source de lumière de lecture fait émettre de la lumière de luminescence par les sondes activées. Le dispositif de division de faisceaux divise la lumière de luminescence en au moins deux parcours pour former au moins deux plans de détection qui correspondent à un même nombre ou à des nombres différents de plans d'objets de l'échantillon. La caméra détecte simultanément les deux ou plusieurs plans de détection, le nombre de plans d'objets étant représenté dans la caméra par le même nombre de parties d'étude enregistrées. Le contrôleur peut être programmé pour combiner en données 3D un signal des régions étudiées.