METHOD FOR THE PRODUCTION OF PROTEINS OR PROTEIN FRAGMENTS

The present invention relates to a method for selecting a suitable expression construct from a plurality of expression constructs for optimizing the production of a protein or a fragment thereof in a host cell, a method for the production of proteins or fragment thereof using the selcted expression vector, to novel human embryonic kidney cells that are deficient in N-acetylglucosaminyltransferase I and stably transfected with EBNA (HEK 293E GnTI'cells) that are well suitable for use in the said method, in particular for the production of proteins or protein fragments that are suitable for X-ray studies. The invention also relates to a method to produce HEK 293E GnTI' cells and a method to confer to HEK293E GnTI' cells, the capacity to grow in suspension and to a method to confer to HEK293E GnTl' cells, the capacity to grow in serum free medium. The invention also relates to a kit comprising different vectors suitable for use of the above method for the production of proteins or protein fragments. La présente invention concerne un procédé permettant de sélectionner un produit de recombinaison d'expression approprié à partir d'une pluralité de produits de recombinaison d'expression afin d'optimiser la production d'une protéine ou d'un fragment de protéine dans une cellule hôte, un procédé de production de protéines ou de fragments de protéines en utilisant le vecteur d'expression sélectionné, des cellules rénales embryonnaires humaines nouvelles qui présentent un déficit en N-acétylglucosaminyltransférase I et qui sont transfectées de façon stable avec des EBNA (cellules HEK 293E de GnTI') appropriées pour être utilisées dans ledit procédé, en particulier pour la production de protéines ou de fragments de protéines qui sont appropriées pour des études par rayons X. L'invention concerne également un procédé pour produire des cellules HEK 293E de GnTI' et un procédé pour conférer aux cellules HEK293E de GnTI la capacité de se développer en suspension et un procédé pour conférer aux cellules HEK293E GnTl' la capacité de se développer dans un milieu sans sérum. L'invention concerne également un kit comprenant différents vecteurs appropriés pour être utilisés dans le procédé ci-dessus pour la production de protéines ou de fragments de protéines.