DETECTION AND QUANTIFICATION OF CYCLIC IMINES, BASED ON COMPETITIVE BINDING TO NICOTINIC ACETYLCHOLINE RECEPTORS

The invention relates to a cyclic imine quantification method based on competitive binding to nicotinic acetylcholine receptors. Gymnodimine cyclic imines and spirolides can appear as contaminants in sea water molluscks intended for human consumption. The invention makes use of the fact that said cyclic imines can bind to nicotinic acetylcholine receptors in a competitive manner with a-bungarotoxin in order to develop a method for detecting these toxins in solution. The invention is based on quantifying the binding of the nicotinic receptors to a-bungarotoxin, using techniques that detect molecular interactions, such as measuring fluorescence polarisation changes or monitoring changes in the refractive index close to a surface. The a-bungarotoxin-to-receptor binding signal is inhibited by the presence of cyclic imines in solution, thereby enabling the quantification of said sea water toxins using a pre-calibration. Procedimiento de cuantificación de iminas cíclicas basado en la unión competitiva a receptores nicotínicos de acetilcolina. Las iminas cíclicas gymnodiminas y espirólidos pueden aparecer como contaminantes en moluscos marinos destinados al consumo humano. Se ha utilizado la capacidad de estas iminas cíclicas de unirse a los receptores nicotínicos de acetilcolina de forma competitiva con la a-bungarotoxina para desarrollar un método de detección de estas toxinas en solución. La invención se basa en la cuantificación de la unión de los receptores nicotínicos a la a-bungarotoxina utilizando técnicas que detectan interacciones moleculares, como la medición de los cambios de polarización de fluorescencia o la monitorización de cambios del índice de refracción en las proximidades de una superficie. Esta señal de unión de a-bungarotoxina al receptor se inhibe por la presencia de iminas cíclicas en solución, permitiendo la cuantificación de estas toxinas marinas mediante una calibración previa. L'invention concerne un procédé de quantification d'imines cycliques basé sur la liaison compétitive aux récepteurs nicotiniques de l'acétylcholine. Les imines cycliques gymnodimines et spirolides peuvent être considérées comme des contaminants dans les mollusques marins destinés à la consommation humaine. On a utilisé la capacité de ces imines cycliques à se lier aux récepteurs nicotiniques de l'acétylcholine de manière compétitive avec l'a-bungarotoxine pour la mise au point d'une méthode de détection de ces toxines en solution. L'invention se base sur la quant